МИКРОБИОЛОГИЯ
ХИМИЯ
Главная О компании Партнеры Контакты Новости
МикроБио
МикроБио

(495) 221-20-26
E-mail
Пароль регистрация
напомнить пароль


МИКРОБИОЛОГИЯ » 3M Petrifilm - Петрифильмы» МУК 4.2.2884-11 Методы микробиологического контроля с использованием петрифильмов» 12.3. Одновременное выявление и определение количества колиформных бактерий (БГКП) и E.coli

12.3. Одновременное выявление и определение количества колиформных бактерий (БГКП) и E.coli



МУК 4.2.2884-11 Методы микробиологического контроля объектов окружающей среды и пищевых продуктов с использованием петрифильмов

Содержание

1. Область применения
2. Нормативные ссылки
3. Требования к помещениям и условиям безопасности
4. Аппаратура и материалы
5. Описание и принцип действия
6. Сущность метода
7. Методы отбора проб
8. Подготовка проб к испытанию
9. Подготовка петрифильмов
10. Определение количества мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов (КМАФАнМ)
11. Определение количества дрожжей и плесневых грибов
12.1. Выявление и определение количества колиформных бактерий (БГКП)
12.2. Выявление и определение количества бактерий вида Escherichia coli
12.3. Одновременное выявление и определение количества колиформных бактерий (БГКП) и E.coli
13. Выявление и определение количества бактерий семейства Enterobacteriaceae
14. Выявление и определение количества Staphylococcus aureus
15.1. Микробиологический контроль смывов с поверхностей
15.2. Микробиологический контроль воздушной среды помещений



12.3. Одновременное выявление и определение количества E.coli и колиформных бактерий (БГКП)

12.3.1. Для одновременного выявления и определения количества Escherichia coli и колиформных бактерий применяется тип петрифильма «3М™ Petrifilm™ E.coli/Coliform Count (ЕС)». Петрифильм (ЕС) содержит питательную основу среды VRB (кристаллический фиолетовый с желчью), а также хромогенный субстрат (5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронид) для выявления специфического фермента, продуцируемого Eoli - β-глюкуронидазы. Данный фермент расщепляет хромогенный субстрат с образованием окрашенных продуктов реакции, в результате чего колонии E.coli приобретают синий цвет. Среда содержит тетразолиевый индикатор, в результате чего колонии колиформных бактерий окрашиваются в красный цвет. Образующийся при ферментации лактозы газ задерживается верхней пленкой петрифильма и скапливается вокруг колоний. Наличие газа вокруг колоний при ферментации лактозы является важным биохимическим признаком колиформных бактерий.

12.3.2. Методы отбора проб по п. 7.

12.3.3. Подготовка образца к испытанию по п. 8.

12.3.4. Подготовка петрифильмов к испытанию по п. 9.

12.3.5. Порядок проведения испытания.

12.3.5.1. Петрифильм помещают на ровную поверхность. Приподнимают верхнюю пленку.

12.3.5.2. Из исследуемого образца или его соответствующего разведения, приготовленного по п.12.3.3, отбирают пробу объемом (1,0±0,1) см3 и вносят на поверхность подложки в центр петрифильма. Аккуратно опускают верхнюю пленку петрифильма, избегая захвата пузырьков воздуха.

12.3.5.3. Помещают пластиковый распределитель в центр петрифильма плоской стороной вниз (выемкой вверх). Мягко надавливают на центр распределителя для равномерного распределения образца. Не следует перемещать или крутить распределитель по петрифильму!

12.3.5.4. Убирают распределитель и оставляют петрифильм на 1-2 минуты для затвердевания геля.

12.3.5.5. Для определения колиформных бактерий (БГКП) посевы инкубируют при температуре (37±1)°C в течение (24±2) часов в горизонтальном положении прозрачной стороной вверх в условиях повышенной влажности. Для определения E.coli инкубацию продлевают до (48±4) часов. Допускается размещать петрифильмы друг на друга по 20 штук.

12.3.6. Обработка результатов

12.3.6.1. После инкубирования посевов по п. 12.3.5.5 на петрифильме учитывают количество колоний визуально или автоматически (с помощью Петрифильм-Ридера – 3М™ Petrifilm™  Plate Reader). Колиформные бактерии образуют колонии красного цвета, а E.coli - колонии синего цвета, а с пузырьками газа вокруг колоний. Для учета E.coli подсчитывают количество синих колоний с пузырьками газа. Общее количество колиформных бактерий включает как красные, так и синие колонии, связанные с образованием газа в течение 24-48 часов.

12.3.6.2. Для подсчета отбирают петрифильмы, на которых выросло от 15 до 150 колоний. Полученный результат умножают на величину соответствующего разведения и получают количество колоний E.coli в 1,0 см3 (г) образца.

12.3.6.3. Результат исследований округляют и записывают по ГОСТ 26670.

12.3.6.4. При необходимости колонии могут быть изолированы для дальнейшей идентификации по ГОСТ Р 52816 и ГОСТ 30726.

Примечание.
Не учитывают колонии, выросшие на пенопластовом ограничителе зоны роста.

При окрашивании зоны роста петрифильма в синий или красный цвет либо при  потемнении цвета геля (большое число колоний E.coli или колиформных бактерий) для получения количественного результата готовят разведения образца и заново проводят анализ. 


МикроБио, (495) 221-20-26, info@mibio.ru Создание сайта Wilmark Design

Карта сайта  Яндекс.Метрика