МИКРОБИОЛОГИЯ
ХИМИЯ
Главная О компании Партнеры Контакты Новости
МикроБио
МикроБио

(495) 221-20-26
E-mail
Пароль регистрация
напомнить пароль



Спиральный метод посева (Eddy Jet 2)



Разделы статьи:

Посев исследуемого образца
В классической бактериологии существует три основных способа посева: глубинный (или посев заливкой), прямой поверхностный (или посев поверхностным распределением) и посев мембранной фильтрацией. Помимо техники выполнения, они отличаются максимальным объемом высеваемого материала, и максимальным количеством колоний, учитываемых при данном способе посева (таб.1). Максимальное общее содержание бактерий в образце не должно превышать 1000-3000 КОЕ/мл (в зависимости от способа посева). При исследовании загрязненных образцов необходимо выполнять серийные (обычно десятикратные) разбавления исследуемого материала для достижения концентрации, доступной для подсчета. При неизвестных уровнях микробной контаминации образца приходится проводить 3-5 десятикратных разбавлений и соответствующее количество посевов. Это делает исследование громоздким и трудоемким, так как подобные манипуляции плохо поддаются автоматизации и выполняются вручную.

Существует еще один способ бактериологического посева - спиральный метод посева, при котором нет необходимости выполнять большое количество разбавлений образца. Спиральный посев позволяет на одной 90 мм чашке Петри со средой уместить посев, эквивалентный трем десятикратным разбавлениям (таб.1). Спиральный посев выполняется специальным автоматическим устройством, что обеспечивает высокую точность и воспроизводимость анализа. 


Спиральный метод посева. Eddy Jet 2
Спиральный метод поверхностного посева широко распространен за рубежом. Метод разработан в 1970-е годы для сокращения количества чашек с питательной средой, используемых для посевов. Изначально данный метод в основном применялся для исследования молочных продуктов [1], однако в последние годы он используется для оценки численности живых бактерий и грибов в различных объектах. Спиральный метод посева одобрен такими организациями как AOAC [2], ISO [3] и FDA [4]. Метод используется также для проведения МИК-теста, с целью определения минимальной ингибирующей концентрации антибиотика [5]. 

Устройство спирального посева Eddy Jet 2 (рис.4) вращает чашку с питательной средой, нанося уменьшающееся количество образца на поверхность питательной среды по траектории Архимедовой спирали. После инкубации посевов колонии микроорганизмов распределяются вдоль спиральной траектории с радиальным уменьшением их концентрации. При спиральном методе посев на одной 90 мм чашке Петри эквивалентен трем, а на чашке 150 мм – пяти десятикратным разбавлениям.

Eddy Jet 2 способен воспроизводить 22 спиральных распределения (или 34 при использовании 150 мм чашек). Каждому типу соответствует свой уникальный характер распределения образца по спирали. Используют разные типы распределения образца: логарифмическое, линейное и равномерное.

При использовании логарифмических распределений объемы образца, наносимые вдоль спирали логарифмически уменьшаются, что обеспечивает резкое снижение концентрации материала на различных участках спирали. Логарифмический способ спирального посева является наиболее распространенным при определении количества бактерий или грибов. Именно он позволяет получить на одной чашке эквивалент 3-5 десятикратных разбавлений.

Главной особенностью Eddy Jet 2 является использование высокоточных одноразовых микрошприцев, стерилизованных гамма-радиацией. Микрошприцы (110 мкл) позволяют чрезвычайно точно наносить материал образца на поверхность среды и предотвращают любую перекрестную контаминацию. Кроме того, стерилизация гамма-радиацией делает ненужными этапы их очистки, что экономит большое количество времени. Угол, под которым микрошприц контактирует с поверхностью агара, гарантирует равномерное нанесение жидкости.

В отличие от других устройств спирального посева Eddy Jet 2 не требует дезинфекции. Это позволяет избегать ложноотрицательных результатов, которые могут возникать из-за ингибирующего воздействия остатков дезинфектанта на бактерии в образце. Таким образом, EddyJet 2 предлагает лабораториям самую высокую специфичность среди устройств, предложенных на рынке.                 

Несмотря на сложность процесса Eddy Jet 2 является простым в управлении устройством. Интуитивно понятные пиктограммы позволяют оператору легко разобраться в программном обеспечении устройства. Программа позволяет выбрать параметры максимально подходящие для целей исследования: количество повторных посевов образца; вариант спирального распределения; количество циклов промывки микрошприца для удаления пузырьков воздуха;  тип подачи образца (автоматически или вручную). Прибор обладает широкими коммуникационными возможностями: сетевым соединением, двумя USB портами и двумя RS-232 портами, а также разъемом для штрих-код ридера. К устройству можно подключить принтер для распечатки этикеток и протокола посева.

Алгоритм посева предельно прост. После задания параметров и нажатия кнопки «пуск» устройство захватывает из кассеты стерильный шприц, набирает образец из стерильного стаканчика, установленного в соответствующей нише прибора (при автоматическом типе подачи материала) или из емкости, которую держит оператор (при ручном способе подачи образца). Затем прибор наносит материал образца на поверхность вращающейся чашки Петри со средой в соответствии с выбранным распределением, после чего посев завершен. После инкубации в термостате учитывают численность микроорганизмов.


МикроБио, (495) 221-20-26, info@mibio.ru Создание сайта Wilmark Design

Карта сайта  Яндекс.Метрика