Инструкция

Хромогенный агар для выделения Enterobacter sakazakii - Chromocult^® Enterobacter Sakazakii Agar

Кат.№ 1.00873.0500

Упаковка – 500 г

Нестерильные сухие детские молочные смеси могут содержать патогенные микроорганизмы. Одним из наиболее опасных патогенов является Enterobacter sakazakii, который может вызывать менингиты у новорожденных и грудных детей. Селективный хромогенный агар предназначен для выделения Enterobacter sakazakii из сухого молока и других сухих смесей детского питания. МУК 4.2.2428-08.

Принцип действия

Хромогенный агар обеспечивает хороший рост и яркий цвет колоний E.sakazakii. Добавление в среду ингибиторов инкубация при 44^оС в значительной степени подавляет рост сопутствующей грамположительной и грамотрицательной микрофлоры. Хромоген­ный субстрат (5-бромо4-хлоро-3-иднолил-α-D-глюкопиранозид) позволяет выявлять α-D-глюкозидаза положительные сине-зеленые колонии E.sakazakii.

Состав

Пептон 6,0; хлорид натрия 5,0; соли желчных кислот 1,5; хромогенный субстрат (5-бромо4-хлоро-3-иднолил-α-D-глюкопиранозид); агар-агар 12,0.

Приготовление

Растворить 24,6 г в 1 литре дистиллированной воды, нагреть на кипящей водяной бане до полного растворения. Автоклавировать при 121^оС 15 мин.

рН 7,0±0,2 при 25^оС.

Готовая среда прозрачная светло-желтого цвета.

Чашки следует хранить в темноте при 2-8^оС не более 2 недель.

Основные этапы исследования (в соответствии с ИСО 22964)

1. Этап неселективного обогащения. Инкубировать 10 г образца с 90 мл забуференной пептонной воды в течение 18 ч при 37^оС
2. Этап селективного обогащения. Инкубировать в течение 24 ч при 45^оС на модифицированном лаурил-сульфатном бульоне с ванкомицином mLSB-Vancomycin.
3. Выделение на Chromocult Enterobacter sakazakii agar.

Агар на чашках должен быть сухой. При наличии конденсата следует подсушить чашки перед использованием (например, 20 мин при 55С).

Посев проводится петлей со среды обогащения  для получения изолированных колоний.

Инкубируют 24 ч при 44°С.

Примечание: Температура выше 45^оС ингибирует рост E.sakazakii, а ниже 43^оС снижает эффект ингибирования сопутствующей микрофлоры.

Не группировать чашки в стопки более чем по 3 чашки.

Учет результатов:

Колонии E.sakazakii сине-зеленого цвета. Сопутствующая микрофлора – бесцветные колонии. Не требуется проводить никаких подтверждающих тестов.

Контроль качества