Инструкция

Триптоза-сульфит-циклосерин (TSC) агар –

TSC agar Tryptose sulfite cycloserine agar (base) for microbiology

Кат.№1.11972.0500,

       упаковка – 500 г

Селективная добавка для определения Cl.perfringens –

Clostridium perfringens selective supplement for microbiology

     Кат.№1.00888.0010,

упаковка - 10 флаконов

Среда для выделения и учета вегетативной и споровой форм Clostridium perfringens в пищевых продуктах, клиническом материале, других объектах, предложенная Harmon (1971). Согласовано с рекомендациями ИСО (1978); DIN Norm 10165 по анализу мяса и мясных продуктов, а также АРНА по исследованию продуктов питания (1992).

Принцип действия

Превосходная питательная основа среды обеспечивает оптимальные условия для развития клостридий. Колонии, продуцирующие сероводород, отличаются черным цветом в результате реакции сульфита и соли железа. Циклосерин подавляет сопутствующую бактериальную микрофлору, а развившиеся колонии остаются малых размеров. Цикосерин также уменьшает диффузию и связанное с нею нарушение черных зон вокруг колоний Cl.petfringens.

Флюорогенный субстрат 4-метилумбеллифирилфосфат (MUP) распадается под воздействием кислой фосфатазы - характерного фермента Clostridium perfringens. Наличие специфического фермента кислой фосфатазы определяется по флюоресценции продукта реакции при воздействии ультрафиолета (366 нм) на чашки с агаризованной средой.

Состав (г/л)

Триптоза 15,0; пептон из сои 5,0; дрожжевой экстракт 5,0; бисульфит натрия 1,0; цитрат аммонийного железа 1,0; агар-агар 15,0.

Дополнительно необходимо добавить к основы среды TSC-агар селективную добавку для определения Cl.perfringens – Clostridium perfringens selective supplement for microbiology, Кат.№1.00888.0001.

Состав селективной добавки: 1 флакон добавки содержит 200 мг циклосерина; и 50 мг 4-метилумбилефирил-фосфат (флюорогенная добавка).

Приготовление

Растворить 42 г среды в 1 литре дистиллированной воды, дать среде набухнуть в течение 20-30 минут. Автоклавировать 15 мин при 121°С. Содержимое флакона селективной добавки (Кат.№1.00888.0001) растворить в 3 мл дистиллированной среды и добавить к 500 мл охлажденной до 50^оС питательной основы TSC-агара.

Готовая среда прозрачная, светло-коричневого цвета. В то время как готовая основа питательной среды может храниться несколько месяцев, готовая селективная среда пригодна только в течение четырех дней.

рН 7,4±0,2 при 25°С.

Проведение анализа

Посевы производят глубинным и поверхностным способами. Инкубируют в течение 18-24 ч при 44°С в анаэробных условиях (Anaerocult^®A, Anaerocult^®А-мини, Anaerocult^®P). Cl.perfringens образует черные колонии. Наличие флюоресценции у черных колоний указывает на присутствие Cl.perfringens.

Контроль качества