Фирма Merck KGaA (Германия) разработала ускоренный метод обнаружения сальмонелл с использованием среды Salmosyst®. Данный метод позволяет сократить время исследования сальмонелл на 24-48 ч.
Все микроорганизмы, присутствующие в образце, вначале проходят стадию неселективного обогащения на среде Salmosyst® Broth Base. Затем следует стадия селективного обогащения. Для этого в среду добавляются таблетки Salmosyst® Selective Supplement, которые содержат селективные агенты, обеспечивающие преимущественный рост сальмонелл и подавление роста сопутствующей микрофлоры.
Состав среды Salmosyst® Broth Base (г/л)
Пептон из казеина 5.0; пептон мясной 5.0; хлорид натрия 5.0; карбонат кальция 10.0.
Состав Salmosyst® Selective Supplement (г/л)
Тетратионат калия 0.2; соли желчных кислот 0.08; бриллиантовый зеленый 0,0007;карбонат кальция 0,1.
Неселективное обогащение
25 г образца и 225 мл среды Salmosyst® Broth Base инкубировать 6-8 часов при 35оС. Перенести 10 мл культуральной среды в стерильную пробирку.
Селективное обогащение
Добавить одну таблетку Salmosyst® Selective Supplement к 10 мл культуральной среды и оставить на 30 мин. Затем интенсивно перемешать и инкубировать 18-22 часа при 35оС.
Идентификация
Для определения сальмонелл сделать высев из пробирки на селективную агаризованную среду (Rambach-агар).
Использование ускоренного метода выявления сальмонелл со средой Salmosyst® одобрено Центром Гигиены и Эпидемиологии Роспотребнадзора
(МР №24ФЦ/976) и разрешено к применению в лабораториях санитарно-эпидемиологической службы, осуществляющих государственный и ведомственный контроль, а также в производственных лабораториях.
Контроль качества Salmosyst® Selective Supplement
Тест-штаммы |
Рост |
Salmonella typhimurium ATCC 14028 |
хороший |
Salmonella dublin ATCC 15480 |
хороший |
Escherichia coli ATCC 25922 |
подавлен |
Enterococcus faecalis ATCC 19433 |
подавлен |
Основа среды Salmosyst – Salmosyst® Broth base for microbiology
Кат.№1.10153.0500,
Упаковка – 500 г
Селективная добавка Salmosyst – Salmosyst® selective supplement tablets for microbiology
Кат.№1.10141.0001,
упаковка - 250 таблеток
Двухэтапное обогащение сальмонелл, особенно для поврежденных клеток; выделение сальмонелл из продуктов и кормов.
Способ действия
Все микроорганизмы, присутствующие в образце, вначале проходят стадию неселективного обогащения на жидкой среде Salmosyst® Broth Base. Затем следует стадия селективного обогащения. Для этого в среду добавляются таблетки Salmosyst® Selective Supplement, которые содержат селективные агенты, обеспечивающие преимущественный рост сальмонелл, а рост сопутствующей микрофлоры подавляется.
Состав среды (г/л)
Пептон из казеина 5,0; пептон мясной 5,0; хлорид натрия 5,0; карбонат кальция 10,0.
рН 7,1±0,2 при 25оС
Состав добавки Salmosyst® Selective Supplement (г/л)
Тетратионат калия 0,2; соли желчных кислот 0,08; бриллиантовый зеленый 0,0007; карбонат кальция 0,1.
Приготовление
Растворить 25 г среды в 1 л дистиллированной воды, автоклавировать 15 мин при 121оС. Образование видимого осадка карбоната кальция не влияет на качество среды. При длительном хранении среды карбонат кальция может раствориться и незначительно повысить рН.
Неселективное обогащение
Перемешать 25 г образца (при необходимости гомогенизировать) с 225 мл среды Salmosyst® Broth Base и инкубировать 6-8 часов при 37оС. Перенести 10 мл культуральной среды в стерильную пробирку.
Селективное обогащение
Добавить одну таблетку Salmosyst® Selective Supplement к 10 мл культуральной среды и оставить на 30 мин. Затем интенсивно перемешать и инкубировать 18-22 часа при 37оС. Для определения сальмонелл сделать высев из пробирки на селективную агаризованную среду (Rambach-агар или XLT-4-агар).
Контроль качества
Тест-штаммы |
Рост |
Salmonella typhimurium ATCC 14028 |
хороший |
Salmonella dublin ATCC 15480 |
хороший |
Escherichia coli ATCC 25922 |
подавлен |
Enterococcus faecalis ATCC 19433 |
подавлен |