Агар TCBS для селективного выделения Vibrio cholera – TCBS agar for the isolation and selective cultivation of Vibrio cholera
Кат.№1.10263.0500, упаковка – 500 г
Тиосульфат-цитратный агар с сахарозой и желчью представлен Nakanishi (1962), модифицирован Kobayashi с сотр.(1963) и используется для выделения и селективного культивирования Vibrio cholerae и других энтеропатогенных вибрионов (NAG вибрионы, V.parahaemolyticus). Среда соответствует рекомендациям ВОЗ (1965, 1967) и АРНА(1992).
Принцип действия
Высокие концентрации тиосульфата и цитрата, а также высокая щелочность среды в значительной степени подавляют рост энтеробактерий. Бычья желчь и холаты подавляют главным образом энтерококков. Колиформные бактерии, которые смогут вырасти, не метаболизируют сахарозу. Лишь несколько сахарозоположительных штаммов протея могут расти на этой среде с образованием желтых колоний, похожих на колонии вибрионов. Смешанный индикатор тимоловый синий-бромтимоловый синий желтеет при образовании кислоты даже в сильно щелочной среде.
Состав (г/л)
Пептон из казеина 5,0; пептон из мяса 5,0; дрожжевой экстракт 5,0; цитрат натрия 10,0; тиосульфат натрия 10,0; бычья желчь 5,0; холеиновокислый натрий 3,0; сахароза 20,0; хлористый натрий 10,0; цитрат железа(III)1,0; тимоловый синий 0,04; бромтимоловый синий 0,04; агар-агар 14,0.
Приготовление
Растворить 88 г среды в 1 литре дистиллированной воды и разлить в чашки.
Среда не подлежит автоклавированию! рН 8,6±0,2 при 25°С. Среда прозрачная, сине-зеленого цвета.
Проведение анализа
Среду инокулируют материалом с накопительных сред поверхностным способом. Инкубируют 18-24 ч при 35°С в аэробных условиях. Рекомендуется (Burkhardt, 1969) в дополнение к жидкой накопительной среде еще использовать две разные плотные - высокоселективную (например, TCBS-агар) и менее селективную (например, Питательный агар).
Внешний вид колоний |
Микроорганизмы |
Плоские, 2-3 мм в диаметре, желтые |
Vibrio cholerae, Vibrio cholerae type El Tor |
Мелкие с сине-зеленым центром |
Vibrio parahaemolyticus |
Крупные желтые |
Vibrio alginolyticus |
Голубые |
Pseudomonas, Aeromonas и др. |
Очень мелкие, прозрачные |
Enterobacteriaceae и др. |
Контроль качества
Тест-штаммы |
Рост |
Желтый цвет среды |
Vibrio alginolyticus |
хороший / очень хороший |
+ |
Vibrio cholerae Inaba NIH 35 |
хороший / очень хороший |
+ |
Vibrio cholerae El Tor Inaba CH 38 |
хороший / очень хороший |
+ |
Vibrio cholerae Ogawa NIH 41 |
хороший / очень хороший |
+ |
Vibrio cholerae El Tor Ogawa CH 60 |
хороший / очень хороший |
+ |
Vibrio parahaemolyticus ATCC 17802 |
хороший / очень хороший |
- |
Escherichia coli ATCC 25922 |
роста нет / слабый |
- |
Enterobacter cloacae ATCC 13047 |
роста нет / слабый |
- |
Proteus mirabilis ATCC 14273 |
роста нет / слабый |
- |
Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 |
роста нет / слабый |
- |