Гектоеновый агар – Hektoen enteric agar for the detection and isolation of pathogenic intestinal bacteria
Кат.№111681.0500
Упаковка – 500 г
Селективный агар, предложенный King и Metzger (1968) для обнаружения и выделения патогенных энтеробактерий включая Salmonella и Shigella из различных объектов.
При сравнении с другими селективными средами (SS-aгap, BPLS-агар – (актозный агар с бриллиантовым зеленым и феноловым красным), висмут-сульфитный агар) гектоеновый агар слабее угнетает Salmonella и Shigella, обеспечивая их хороший рост, и в то же время достаточно подавляет развитие сопутствующих микроорганизмов.
Принцип действия
Колонии лактозо-позитивных бактерий четко отличаются по цвету от лактозо-негативных благодаря присутствию двух индикаторов: бромтимолового синего и кислого фуксина. Такое различие в цвете наблюдается даже у колоний, слабо ферментирующих лактозу, благодаря присутствию сахарозы и салицина. Эти соединения легче ферментируются, поэтому ложноположительного результата можно избежать. Сочетание тиосульфата как реактивного компонента и солей железа как индикатора приводит к почернению H2S-положительных колоний. Смесь солей желчных кислот подавляет рост большинства сопутствующих микроорганизмов. Hoben (1973) рекомендует внесение 10-20 мг/л новобиоцина для усиления селективных свойств среды, т.е. подавления Citrobacter и Proteus, которые образуют колонии, похожие на колонии Salmonella (черный центр).
Состав (г/л)
Пептоны 15,0; хлористый натрий 5,0; дрожжевой экстракт 3,0; сахароза 14,0; лактоза 14,0; салицин 2,0; тиосульфат натрия 5,0; цитрат аммонийного железа 1,5; смесь солей желчных кислот 2,0; бромтимоловый синий 0,05; фуксин кислый 0,08; агар-агар 13,5.
Приготовление
Растворить 75 г среды в 1 л дистиллированной воды и дать среде набухнуть в течение 20-30 минут. Осторожно подогревать до кипения и полного растворения среды.
Среду не автоклавировать! При необходимости добавить 15 мг/л новобиоцина в охлажденную до 50°С среду в виде простерилизованного фильтрованием раствора. Готовую среду разлить в чашки. рН 7,7±0,2 при 25 °С.
Проведение анализа
Питательную среду инокулируют материалом из накопительной культуры тонким слоем. Инкубация 18-24 ч при 35°С аэробно. Внешний вид колоний бактерий приведен в таблице. Предполагаемые колонии патогенных видов должны быть подвергнуты дальнейшим исследованиям для подтверждения идентификации.
Внешний вид колоний |
Микроорганизмы |
Зеленые, влажные, плоские, прозрачные |
Shigella, Providencia |
Сине-зеленые с черным центром или без него |
Salmonella, Paracolobactum, Proteus |
Цвет от зеленого до синеватого, колонии плоские с неровными краями |
Pseudomonas |
Оранжево-красные, окруженные зоной преципитации |
Колиформные бактерии |
Контроль качества
Тест-штаммы |
Инокулюм, КОЕ/мл |
Выход, (%) |
Цвет колоний |
Черный цвет |
Преципитат |
Escherichia coli ATCC 25922 |
< 105 |
≥ 30 |
Оранжево-красный |
- |
± |
Enterobacter cloacae ATCC 13047 |
103-105 |
≥ 30 |
Оранжево-красный |
- |
± |
Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 |
103-105 |
≥ 30 |
Оранжево-красный |
- |
+ |
Salmonella typhimurium ATCC 14028 |
103-105 |
≥ 20 |
Сине-зеленый |
+ |
- |
Salmonella enteritidis ATCC 13076 |
103-105 |
≥ 20 |
Сине-зеленый |
+ |
- |
Shigella flexneri ATCC 12022 |
103-105 |
≥ 5 |
Зеленый -сине-зеленый |
- |
- |
Shigella sonnei ATCC 11060 |
103-105 |
≥ 20 |
Зеленый -сине-зеленый |
- |
- |
Proteus mirabilis ATCC 14273 |
103-105 |
≥ 30 |
Зеленый -сине-зеленый |
± |
- |
Enterococcus faecalis ATCC 11700 |
> 105 |
≤ 0,01 |
|
|
|
Staphylococcus aureus ATCC 25923 |
> 105 |
≤ 0,01 |
|
|
|