отправить
заявку
категории
Микробиология » Питательные среды Мерк » Сухие питательные среды » Список инструкций питательных сред » 111681 Hektoen enteric agar - Питательная среда - Гектоеновый агар » Инструкция

Инструкция


    Гектоеновый агарHektoen enteric agar for the detection and isolation of pathogenic intestinal bacteria

    Кат.№111681.0500

    Упаковка – 500 г

    Селективный агар, предложенный King и Metzger (1968) для обнаружения и выделения патогенных энтеробактерий включая Salmonella и Shigella из различных объектов.

    При сравнении с другими селективными средами (SS-aгap, BPLS-агар – (актозный агар с бриллиантовым зеленым и феноловым красным), висмут-сульфитный агар) гектоеновый агар слабее угнетает Salmonella и Shigella, обеспечивая их хороший рост, и в то же время достаточно подавляет развитие сопутствующих микроорганизмов.

    Принцип действия

    Колонии лактозо-позитивных бактерий четко отличаются по цвету от лактозо-негативных благодаря присутствию двух индикаторов: бромтимолового синего и кислого фуксина. Такое различие в цвете наблюдается даже у колоний, слабо ферментирующих лактозу, благодаря присутствию сахарозы и салицина. Эти соединения легче ферментируются, поэтому ложноположительного результата можно избежать. Сочетание тиосульфата как реактивного компонента и солей железа как индикатора приводит к почернению H2S-положительных колоний. Смесь солей желчных кислот подавляет рост большинства сопутствующих микроорганизмов. Hoben (1973) рекомендует внесение 10-20 мг/л новобиоцина для усиления селективных свойств среды, т.е. подавления Citrobacter и Proteus, которые образуют колонии, похожие на колонии Salmonella (черный центр).

    Состав (г/л)

    Пептоны 15,0; хлористый натрий 5,0; дрожжевой экстракт 3,0; сахароза 14,0; лактоза 14,0; салицин 2,0; тиосульфат натрия 5,0; цитрат аммонийного железа 1,5; смесь солей желчных кислот 2,0; бромтимоловый синий 0,05; фуксин кислый 0,08; агар-агар 13,5.

    Приготовление

    Растворить 75 г среды в 1 л дистиллированной воды и дать среде набухнуть в течение 20-30 минут. Осторожно подогревать до кипения и полного растворения среды.

    Среду не автоклавировать! При необходимости добавить 15 мг/л новобиоцина в охлажденную до 50°С среду в виде простерилизованного фильтрованием раствора. Готовую среду разлить в чашки. рН 7,7±0,2 при 25 °С.

    Проведение анализа

    Питательную среду инокулируют материалом из накопительной культуры тонким слоем. Инкубация 18-24 ч при 35°С аэробно. Внешний вид колоний бактерий приведен в таблице.   Предполагаемые   колонии   патогенных  видов должны быть подвергнуты дальнейшим исследованиям для подтверждения идентификации.


    Внешний вид колоний

    Микроорганизмы

    Зеленые, влажные, плоские, прозрачные

    Shigella, Providencia

    Сине-зеленые с черным центром или без него

    Salmonella, Paracolobactum, Proteus

    Цвет от зеленого до синеватого, колонии плоские с неровными краями

    Pseudomonas

    Оранжево-красные, окруженные зоной преципитации

    Колиформные бактерии


    Контроль качества

    Тест-штаммы

    Инокулюм,

    КОЕ/мл

    Выход, (%)

    Цвет колоний

    Черный цвет

    Преципитат

    Escherichia coli ATCC 25922

    < 105

    ≥ 30

    Оранжево-красный

    -

    ±

    Enterobacter cloacae ATCC 13047

    103-105

    ≥ 30

    Оранжево-красный

    -

    ±

    Klebsiella pneumoniae ATCC 13883

    103-105

    ≥ 30

    Оранжево-красный

    -

    +

    Salmonella typhimurium ATCC 14028

    103-105

    ≥ 20

    Сине-зеленый

    +

    -

    Salmonella enteritidis ATCC 13076

    103-105

    ≥ 20

    Сине-зеленый

    +

    -

    Shigella flexneri ATCC 12022

    103-105

    ≥ 5

    Зеленый -сине-зеленый

    -

    -

    Shigella sonnei ATCC 11060

    103-105

    ≥ 20

    Зеленый -сине-зеленый

    -

    -

    Proteus mirabilis ATCC 14273

    103-105

    ≥ 30

    Зеленый -сине-зеленый

    ±

    -

    Enterococcus faecalis ATCC 11700

    > 105

    ≤ 0,01

     

     

     

    Staphylococcus aureus ATCC 25923

    > 105

    ≤ 0,01