273176 Enterotube II - Энтеротьюб, идентификация грамотрицательных бактерий

Система   Enterotube   (США) для  идентификации  энтеробактерий  состоит  из  пробирки  с   12  отсеками, заполненными различными агаровыми средами. Через отсеки проходит канал с тонким металлическим стержнем. Выступающим концом стержня касаются колонии и затем протягивают его через все отсеки, засевая  таким  образом  различные  среды.  Некоторые  среды для защиты от воздуха покрыты слоем воска. 

Результаты 15 различных  биохимических  реакций  учитывают  после  инкубации  в  течение 24 ч. К системе Enterotube  прилагается   бланк  фиксирования   результатов. Дальнейшая   идентификация происходит с использованием кодовой книги. 

Энтеротьюбы рекомендуется использовать для характеристики изолированных колоний грамотрицательных оксидаза(-) бактерий. Для выращивания энтеробактерий можно использовать агар Мак-Конки, агар Эндо, SS-агар. 

При  необходимости  проведения  дальнейших тестов или проверки  чистоты, культура  может быть перенесена  из  энтеротьюба в нужную среду или бульон. Для этого достаточно  провести  по  чашке Петри вынутой из трубки стерильным пинцетом иглой. Среда с бактериями также   может быть экстрагирована из отсека с положительной реакцией стерильной петлей после удаления пластиковой пленки.

ИНСТРУКЦИЯ К ПРИМЕНЕНИЮ:

1. Удалите обе крышки. Кончик иглы находится под белой крышкой. Без прокаливания иглы наберите хорошо изолированную колонию прямо на острие иглы. Не прокалывайте агар.
2. ИнокулируйтеII, протягивая иглу через все отсеки и одновременно вращая ее. Вставьте иглу обратно (не стерилизуя) так, чтобы надпил на игле совпадал с краем трубки. Конец иглы должен быть виден в цитратном отсеке.
3. Обломите иглу в месте надпила. Кусок иглы оставшийся в трубке поддерживает анаэробные условия, необходимые для ферментации глюкозы, декарбоксиляции лизина и орнитина и фиксирования газообразных продуктов.
4. Обломком иглы проколите пленку, закрывающую последние восемь отсеков (адонитол, лактоза, арабиноза, сорбитол, VP, дульцитол/PA, и цитрат) для поддержания аэробного роста в этих отсеках. Закройте обе крышки.
5. Инкубацию проводите при 35-37°С, держа трубку по возможности вертикально (например, в специальном штативе для тестовых трубок) отсеком "глюкоза" вверх, или горизонтально, положив ее на плоскую сторону. Время инкубации: 20-24 часа.
6. Проведите анализ всех, за исключением индола и VP, реакций, сравниваяII с рисунком или неинокулированной трубкой. Запишите результаты на интерпретационной полоске. Реакция отрицательна, если отсек остался неизменным (за исключением индола и VP).
7. Для проведения индол-теста положитеII плоской поверхностью вверх на стол или подставку. Впрысните 3-4 капли реагента Ковача прямо под пластиковую пленку отсека H2S/indole.
8. Реакция положительна, в случае проявления красного цвета в добавленном реагенте в течение нескольких секунд.
9. Для проведения VP-теста впрысните 3 капли раствора альфа-нафтола (реагент 1) и 2 капли гидроксида калия (реагент 2) в воздушную прослойку VP-отсека расположенной горизонтальноII. Реакция положительна, в случае образования красного цвета в добавленном реагенте в течение 10 минут.

При необходимости проведения дальнейших тестов или проверки чистоты, культура может быть перенесена в нужную среду или бульон. Для этого достаточно провести по чашке Петри вынутой из трубки стерильным пинцетом иглой. Среда с бактериями также может быть экстрагирована из отсека с положительной реакцией стерильной петлей после удаления пластиковой пленки.