Экспресс-методы диагностики

Экспресс-тесты Singlepath и Duopath для выявления патогенных микроорганизмов и токсинов в пищевых продуктах

Cтатья в журнале "Молочная промышленность", №1, 2015
Д.М. Соколов, М.С. Соколов, ООО «МикроБио»

Разделы статьи:
- Введение
- Экспресс-методы диагностики
- Тест-системы для ускоренной диагностики
- Иммунохроматографический анализ
- Варианты использования ИХА-тестов
- Валидация и сертификация тест-систем Singlepath и Duopath

Экспресс-методы диагностики
Основными современными методами экспресс-диагностики возбудителей являются иммунологические и молекулярные методы детекции. В основе молекулярных методов лежит амплификация короткого участка ДНК или РНК, уникального для целевого возбудителя. Этот участок-мишень распознается с помощью специфических олигонуклеотидных праймеров (затравок) и многократно копируется (амплифицируется) комплексом ферментов. Одним из наиболее распространенных методов амплификации является полимеразная цепная реакция (ПЦР). Экспресс-методы, основанные на иммунологических реакциях, направлены на поиск в исследуемом материале специфических антигенов микроорганизмов (белков, гликопротеидов, липопротеидов, гликолипидов). Наиболее распространенным методом иммунодиагностики является иммуноферментный анализ (ИФА). ПЦР и ИФА, обладая несомненными преимуществами, такими как относительная простота выполнения, быстрота и объективность (за счет автоматизации учета результатов), тем не менее имеют ряд недостатков, что не позволяет полностью заменить ими бактериологический метод. Следует отметить, что обнаружение антигенов или ДНК патогенных микроорганизмов в исследуемом материале не дает информации об их жизнеспособности, так как указанные соединения будут определяться и после гибели клеток. Кроме того, эти методы на несколько порядков уступают бактериологическому методу по чувствительности и не подходят для исследования образцов с низкими уровнями контаминации. Данные методы исследования требуют высокотехнологичного оборудования, комплекса помещений и высококвалифицированного персонала (табл. 1).