Питательная среда Мерк, Германия (Merck KGaA)
Среда Фразера половинной концентрации с добавками в соответствии с ИСО 11290 - ReadyBag Half Fraser (Demi FRASER) Broth with supplements acc. ISO 11290
Кат. № 102449.0060
Упаковка – пакеты (60 шт.) со стерильной средой, 12,5 г
Среда предназначена для первичного селективного обогащения бактерий рода Listeria spp. из пищевых продуктов и кормов для животных, а также из проб окружающей среды и других материалов. Эта питательная среда соответствует стандартам EN ISO 11290, APHA, ГОСТ 32031-2012.
Каждый пакетик среды Readybag Кат.№ 102449.0060 содержит 12,5 г стерильной гранулированной среды Фразера половинной концентрации (Half Fraser), к которой необходимо добавить 225 мл стерильной воды. Пакеты со средой Readybag облучаются гамма-излучением (10-20 кГр).
Принцип действия
Высокое содержание питательных веществ и большая буферная емкость создают оптимальные условия для роста листерий. Рост сопутствующих бактерий в значительной степени ингибируется хлоридом лития, налидиксовой кислотой и гидрохлоридом акрифлавина.
Имеющийся в среде Фразера эскулин расщепляется ферментом листерий β-D-глюкозидазой до эскулетина, который, в свою очередь, образует комплекс черного цвета с цитратом аммонийного железа (III). Однако эта реакция не является строго специфической для листерий. В соответствии с ГОСТ 32031-2012 каждую пробу после этапов первичного и вторичного обогащения на бульоне Фразера необходимо пересеять на селективные агаризованные среды.
Подготовка
Растворить содержимое одного пакета Readybag Half Fraser 12,5 г в 225 мл стерильной дистиллированной воды и перемешать до полного растворения. Приготовленная среда прозрачная или почти прозрачная желтовато-коричневого цвета.
Проведение анализа
В соответствии со стандартом ГОСТ 32031-2012 на этапе первичного обогащения бульон Фразера половинной концентрации (Half Fraser) с внесенным образцом необходимо инкубировать в аэробных условиях при 30°C в течение 24 часов.
В соответствии со стандартом ГОСТ 32031-2012 переносят 0,1 мл культуральной жидкости, полученной после этапа первичного обогащения (независимо от цвета культуральной среды), к 10 мл бульона Фразера для проведения второго этапа обогащения.
В соответствии со стандартом ГОСТ 32031-2012 на этапе вторичного обогащения бульон Фразера с добавленным образцом необходимо инкубировать в аэробных условиях при 37°C в течение 48 часов.
После этапов первичного и вторичного обогащения делают высевы на селективные агаризованные среды (ALOA-агар), указанные в стандарте ГОСТ 32031-2012.
ГОСТ 32031-2012 Методы выявления бактерий Listeria monocytogenes