. |
Хромогенная среда РАМБАХ-агар позволяет дифференцировать энтеробактерии по цвету колоний и быстро выявлять сальмонеллы. Сальмонеллы ферментируют специфический субстрат – пропиленгликоль до кислоты. рН-индикатор среды окрашивает колонии сальмонелл в красный цвет. Колиформные бактерии образуют сине-зеленые колонии. Shigella и Proteus образуют бесцветные, слегка желтоватые колонии. Дезоксихолат натрия ингибирует рост сопутствующих грамположительных бактерий.
Исследуемый образец проходит этап селективного обогащения на среде для выделения сальмонелл и затем высевается на ¼ чашки с РАМБАХ-агаром. Инкубация в аэробных условиях при 37оС. Учет результатов через 24 часа. Специфичность ферментативных реакций обеспечивает высокую точность результатов.
РАМБАХ-агар позволяет идентифицировать сальмонеллы с 99% специфичностью и 97-99% чувствительностью.
Инструкция
РАМБАХ-агар – RAMBACH agar for the identification of Salmonella
Кат.№ 100188.0002, упаковка (4 флакона) для приготовления 250 мл Рамбах агара
Рамбах-агар – хромогенная дифференциально-диагностическая среда для идентификации сальмонелл в пищевых продуктах, сырье и клиническом материале.
Принцип
Питательные вещества РАМБАХ-агара обеспечивают быстрый рост энтеробактерий. Дезоксихолат натрия ингибирует сопутствующую грамположительную микрофлору. Сальмонеллы продуцируют кислоту из пропиленгликоля, в результате чего происходит изменение рН-среды, и колонии сальмонелл окрашиваются в красный цвет. Для дифференциации сальмонелл от колиформных бактерий в состав среды включена хромогенная смесь, которая выявляет наличие фермента ß–галактозидазы – характерного фермента колиформных бактерий. Колиформные бактерии растут в виде сине-зеленых или сине-фиолетовых колоний. Остальные энтеробактерии и грамотрицательные бактерии, такие как Proteus, Pseudomonas, Shigella вырастают в виде бесцветных-желтоватых колоний. РАМБАХ-агар обеспечивает однозначную дифференциацию сальмонелл от других бактерий.
Состав среды (г/л)
Пептон 8.0; хлорид натрия 5.0; дезоксихолат натрия 1.0; хромогенная смесь 1.5; пропиленгликоль 10.5; агар-агар 15.0.
Приготовление среды
Добавить 1 флакон жидкой хромогенной смеси среды к 250 мл дистиллированной воды и перемешать до полного растворения. Добавить 1 флакон порошка среды (питательная основа), дать среде набухнуть в течение 20-30 минут; перемешать до полного растворения. Не должно быть кристалликов агара на стенках колбы. Колбу со средой нагревать на кипящей водяной бане с периодическим помешиванием. Среда полностью растворяется. Стандартное время до полного растворения для 250 мл – 20-25 мин. Среду не перегревать! Не автоклавировать, не перегревать среду!
Охладить среду как можно быстрее на водяной бане 45-50оС. Во время этой процедуры (максимум 30 минут) следует помешивать среду время от времени. Разлить по чашкам. Для предотвращения образования осадка следует разместить чашки Петри на охлажденной поверхности стола (максимум 25оС). Готовые чашки со средой опалесцируют и слегка розовые. Перед посевом чашки следует подсушить. рН: 7.3±0.2 при 25оС. Срок годности и условия хранения готовых чашек - в холодильнике (ниже 6оС) закрытые в пластиковых пакетах – 3 месяца.
Ход исследования
После этапа селективного обогащения посеять на ¼ поверхности агара петлей. Для того чтобы получить изолированные колонии – той же петлей посеять на оставшуюся поверхность чашки. Инкубировать в аэробных условиях 24-48 часов при 35-37оС.
Учет результатов
Микроорганизмы |
Цвет колоний |
Salmonella spp. |
Красный |
Колиформы |
Синие или сине-фиолетовые |
Другие энтеробактерии |
Бесцветные или желтоватые |
Штамм |
Цвет колоний |
Salmonella enteritidis ATCC 13076 |
Красный |
Salmonella typhimurium ATCC 14028 |
Красный |
Escherichia coli ATCC 25922 |
Сине-зеленый |
Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 |
Сине-зеленый |
Shigella flexneri ATCC 29903 |
Желтоватый |
Proteus mirabilis ATCC 14153 |
Желтоватый |
Staphylococcus aureus ATCC 25923 |
Нет роста |
Bacillus cereus ATCC 11778 |
Нет роста |
Кат № | Наименование | Упаковка | Запрос |
---|---|---|---|
Кат.№ 100188.0002 | 100188 Rambach agar - Питательная среда - Рамбах агар | 4 флакона | Узнать цену |
Кат № | Кат.№ 100188.0002 |
---|---|
Наименование | 100188 Rambach agar - Питательная среда - Рамбах агар |
Упаковка | 4 флакона |
Узнать цену |