110398 Fraser broth - Питательная среда - Бульон Фразера

Основа бульона Фразера – FRASER Listeria Selective Enrichment Broth (base) for microbiology
Кат.№110398.0500, упаковка – 500 г

Добавка аммонийного железа к среде Фразера – FRASER Listeria Ammonium iron (III) Supplement (10 vials)
Кат.№100092.0010, упаковка - 10 флаконов

Селективная добавка к среде Фразера – FRASER Listeria Selective Supplement (10 vials)
Кат.№100093.0010, упаковка - 10 флаконов

Двухэтапное селективное обогащение листерий на среде Фразера в соответствии с ИСО 11290-1 (1996)

Принцип действия
Среда создает оптимальные условия для роста листерий благодаря высокому содержанию питательных веществ и большой буферной емкости. Рост сопутствующих бактерий в значительной степени ингибируется хлоридом лития, налидиксовой кислотой и гидрохлоридом акрифлавина. Эскулин расщепляется b-D-глюкозидазой листерий до эскулетина и глюкозы. Эскулетин образует комплекс с ионами железа (III) оливково-зеленого или черного цвета. Рост листерий на бульоне Фразера обычно сопровождается почернением среды. Наилучшие результаты получаются при двухэтапном обогащении, при котором вначале используются половинные концентрации налидиксовой кислоты и гидрохлорида акрифлавина.

Состав среды (г/л)
Протеозный пептон 5.0; пептон из казеина 5.0; дрожжевой экстракт 5.0; мясной экстракт 5.0; хлорид натрия 20.0; фосфат натрия двузамещенный 9.6; калий фосфорнокислый однозамещенный 1.35; эскулин 1.0; хлорид лития 3.0.

Приготовление среды
Растворить 27,5 г среды в 500 мл дистиллированной воды, автоклавировать 15 мин при 121^оС.

Среда Фразера половинной концентрации
Для приготовления среды Фразера половинной концентрации добавить растворенное содержимое 1 флакона цитрата аммонийного железа FRASER Listeria Ammonium iron (III) Supplement и растворенное содержимое 1 флакона селективной добавки FRASER Listeria Selective Supplement к 500 мл основы среды Фразера, когда температура ее после автоклавирования снизится до 45-50^оС. 

Среда Фразера
Для приготовления среды Фразера добавляют растворенное содержимое 1 флакона цитрата аммонийного железа FRASER Listeria Ammonium iron (III) Supplement и растворенное содержимое 2 флаконов селективной добавки FRASER Listeria Selective Supplement к 500 мл основы среды Фразера, когда температура ее после автоклавирования снизится до 45-50^оС.  рН среды: 7,2±0.2 при 25^оС. Приготовленная среда прозрачная желтовато-коричневого цвета.

Процедура исследования

Первый этап селективного обогащения. Среда Фразера половинной концентрации инкубируется с образцом при температуре 30^оС в течение 24±2 часа. Затем из культуральной среды делается высев на Оксфорд, Палкам агар или Chromocult Listeria Agar.

Второй этап селективного обогащения. После этапа первичного обогащения 0,1 мл образца высевается к 10мл среды Фразера и инкубируется 48ч при 37^оС. После 24ч и 48ч инкубации делается высев на Оксфорд, Палкам агар или Chromocult Listeria Agar.