Основа среды ПАЛКАМ для листерий – PALCAM Listeria-Selective agar (Base) acc. to VAN NETTEN et al. for microbiology
Кат.№111755.0500; упаковка – 500 г
Добавка к среде ПАЛКАМ – PALCAM Listeria Selective-Supplement acc. to van Netten et al. for microbiology
Кат.№112122.0010; упаковка – 10 флаконов
Принцип действия
ПАЛКАМ-агар обеспечивает хороший рост Listeria monocytogenes, и в то же время ингибирует рост грам-отрицательных и большинства грам-положительных бактерий. Высокая селективность среды достигается за счет включения в состав полимиксина, акрифлавина, цефтазидима и хлорида лития. L.monocytogenes расщепляет эскулин среды до эскулетина. Эскулетин образует с ионами железа комплекс оливково-зеленого или черного цвета, который окрашивает колонии L.monocytogenes. Маннит-положительные сопутствующие бактерии такие, как стафилококки, если и вырастают, то образуют желтые колонии.
Добавка к среде ПАЛКАМ – это смесь двух антибиотиков и красителя в лиофилизированном виде. Добавка к среде ПАЛКАМ в значительной степени ингибирует рост сопутствующей бактериальной микрофлоры, обеспечивает селективный рост Listeria monocytogenes.
Listeria monocytogenes ATCC 19118 |
Состав среды ПАЛКАМ для листерий (г/л)
Пептон 23,0; дрожжевой экстракт 3,0; крахмал 1,0; хлорид натрия 5,0; агар-агар 13,0 (=Колумбийский агар); D(-) маннит 10,0; цитрат аммонийного железа (III) 0,5; эскулин 0,8; глюкоза 0,5; хлорид лития 15,0; феноловый красный 0,08.
Состав добавки к среде ПАЛКАМ (на флакон)
Полимиксина-В-сульфат 5.0 мг; цефтазидим 10.0 мг; акрифлавин 2.5 мг.
Приготовление среды
Растворить 35,9 г среды в 500 мл дистиллированной воды, дать среде набухнуть в течение 20-30 минут; автоклавировать 15 мин при 121оС. Растворить содержимое флакона добавки к среде ПАЛКАМ в 1 мл дистиллированной воды и добавить к стерильной среде, охлажденной до 45-50оС. При необходимости ополоснуть флакон 1 мл стерильной дистиллированной воды. Хорошо перемешать и разлить по чашкам.
рН: 7,2±0,2 при 25оС.
Приготовленные чашки с добавкой к среде ПАЛКАМ прозрачные темно-красного цвета.
Посев на чашки и оценка результатов
Посеять образец на поверхность среды, инкубировать при 30-37оС в течение 48 часов, предпочтительно в микроаэрофильных условиях. L.monocytogenes растет в виде серо-зеленых колоний с черной зоной вокруг колоний.
Если колонии расположены близко друг с другом, то вся поверхность среды приобретает коричнево-черный цвет. ПАЛКАМ-агар является высокоселективной средой. Если маннит-положительные энтерококки или стафилококки все же вырастают на среде, то их легко отличить по желтому цвету колоний и желтой зоне вокруг колоний.
Необходимо провести дальнейшие биохимические тесты. Подозрительные колонии следует подтвердить биохимическими или серологическими тестами.
Тест-культуры |
Рост |
Почернение |
Listeria monocytogenes ATCC 19118 |
хороший |
+ |
Listeria monocytogenes NCTC 7973 |
хороший |
+ |
Listeria monocytogenes IRH 7 |
хороший |
+ |
Listeria monocytogenes RIUM 3 |
хороший |
+ |
Listeria innocua ATCC 33090 |
хороший |
+ |
Staphylococcus aureus ATCC 25923 |
отсутствие |
- |
Enterococcus faecalis ATCC 19433 |
отсутствие |
- |
Erysipelothrix rhusipathiae ATCC 19414 |
отсутствие |
- |
Escherichia coli ATCC 25922 |
отсутствие |
- |