Триптоза-сульфит-циклосерин (TSC) агар – TSC agar Tryptose sulfite cycloserine agar (base) for microbiology
Кат.№111972.0500,
упаковка – 500 г
Среда для выделения и учета вегетативной и споровой форм Clostridium perfringens в пищевых продуктах, клиническом материале, других объектах, предложенная Harmon (1971). Согласовано с рекомендациями ИСО (1978); DIN Norm 10165 по анализу мяса и мясных продуктов, а также АРНА по исследованию продуктов питания (1992).
Принцип действия
Превосходная питательная основа среды обеспечивает оптимальные условия для развития клостридий. Колонии, продуцирующие сероводород, отличаются черным цветом в результате реакции сульфита и соли железа. Циклосерин подавляет сопутствующую бактериальную микрофлору, а развившиеся колонии остаются малых размеров. Цикосерин также уменьшает диффузию и связанное с нею нарушение черных зон вокруг колоний Cl.petfringens.
Флюорогенный субстрат 4-метилумбеллифирилфосфат (MUP) распадается под воздействием кислой фосфатазы - характерного фермента Clostridium perfringens. Наличие специфического фермента кислой фосфатазы определяется по флюоресценции продукта реакции при воздействии ультрафиолета (366 нм) на чашки с агаризованной средой.
Состав (г/л)
Триптоза 15,0; пептон из сои 5,0; дрожжевой экстракт 5,0; бисульфит натрия 1,0; цитрат аммонийного железа 1,0; агар-агар 15,0.
Дополнительно необходимо добавить к основы среды TSC-агар селективную добавку для определения Cl.perfringens – Clostridium perfringens selective supplement for microbiology, Кат.№100888.0001.
Состав селективной добавки: 1 флакон добавки содержит 200 мг циклосерина; и 50 мг 4-метилумбилефирил-фосфат (флюорогенная добавка).
Приготовление
Растворить 42 г среды в 1 литре дистиллированной воды, дать среде набухнуть в течение 20-30 минут. Автоклавировать 15 мин при 121С. Содержимое флакона селективной добавки (Кат.№100888.0001) растворить в 3 мл дистиллированной среды и добавить к 500 мл охлажденной до 50оС питательной основы TSC-агара.
Готовая среда прозрачная, светло-коричневого цвета. В то время как готовая основа питательной среды может храниться несколько месяцев, готовая селективная среда пригодна только в течение четырех дней.
рН 7,4±0,2 при 25°С.
Проведение анализа
Посевы производят глубинным и поверхностным способами. Инкубируют в течение 18-24 ч при 44С в анаэробных условиях (AnaerocultA, AnaerocultА-мини, AnaerocultP). Cl.perfringens образует черные колонии. Наличие флюоресценции у черных колоний указывает на присутствие Cl.perfringens.
Тест-штаммы |
Рост |
Черные колонии |
Флуоресценция |
Clostridium perfringens ATCC 10543 |
очень хороший |
+ |
+ |
Clostridium perfringens ATCC 13124 |
очень хороший |
+ |
+ |
Clostridium tetani ATCC 19406 |
роста нет / средний |
- |
- |
Clostridium perfringens ATCC 10543 |
Clostridium perfringens ATCC 13124 |