отправить
заявку
категории
Микробиология » Питательные среды Мерк » Сухие питательные среды » Список инструкций питательных сред » 110864 Sulfite iron agar - Питательная среда - Железо-сульфитный агар

110864 Sulfite iron agar - Питательная среда - Железо-сульфитный агар



    Питательная среда Мерк, Германия (Merck KGaA)


    Основа железо-сульфитного агара – Sulfite iron agar base for microbiology

    Кат.№110864.0500, упаковка – 500 г

    Для обнаружения и подсчета клостридий в мясе и мясных продуктах. Среда согласуется с рекомендациями ИСО (1971).


    Принцип действия
    Прогревание образцов мяса при 80°С в течение 1 мин убивает вегетативные клетки присутствующих в нем бактерий, но споры выживают и сохраняют способность к прорастанию. Бактерии, образующие сероводород, восстанавливают сульфит, присутствующий в среде, до сульфида, который реагирует с ионами железа с образованием сульфида железа черного цвета. Колонии таких штаммов окрашиваются в черный цвет; колонии слабо синтезирующих сероводород - в коричневый. В анаэробных условиях клостридии на средах с ионами железа образуют колонии черного цвета.

    Состав (г/л)
    Казеиновый пептон 15,0; дрожжевой экстракт 10,0; сульфит натрия 0,5; агар-агар 15,0.

    Необходимо добавить сульфит железа (II) 1,4.

    Приготовление
    Растворить 40,5 г среды в 1 литре дистиллированной воды, дать среде набухнуть в течение 20-30 минут, разделить на малые объемы. Автоклавировать 15 мин при 121°С;

    Охладить среду до 50°С, добавить 20 мл/л 7% раствора сульфита железа (II), перемешать, разлить в чашки.

    рН 6,9±0,2 при 25°С. Среда прозрачная, от желтоватого до желтовато-зеленого цвета.

    Проведение анализа
    Приготовление образца: в соответствии с рекомендациями ИСО измельченный материал гомогенизирует с девятикратным по его весу количеством стерильного раствора (пептон из казеина 0,1 %, цистеин-хлорид 0,05 %, хлористый натрий 0,85 %). Переносят 50 мл в колбу вместимостью 100 мл и прогревают 1 мин при 80°С на водяной бане. Затем быстро охлаждают холодной водой. Материал наносят на две чашки с сульфит-железным агаром и инкубируют: одну чашку аэробно, другую анаэробно - до двух суток при 30°С. Считают, что мезофильные клостридии присутствуют, если: а) черные колонии образуются только в анаэробных условиях, б) проба на каталазу с реагентом Bactident®-Catalase - отрицательна. Если образуется газ, культура считается каталазоположительной. Если газообразования нет, культура каталазотрицательна.

    Следует учесть, что для образования колоний в чашках Петри поверх среды необходимо нанести еще один слой и инкубировать посев в анаэробных условиях. Посев в пробирках с наслоением можно инкубировать аэробно.



    Контроль качества

    Тест-штаммы

    Рост

    Черные колонии

    Clostridium perfringens ATCC 10543

    очень хороший

    +

    Clostridium perfringens ATCC 13124

    очень хороший

    +

    Clostridium botulinum

    очень хороший

    +

    Escherichia coli ATCC 25922

    средний

    -

    Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853

    слабый / средний

    -

    Bacillus cereus ATCC 11778

    слабый / хороший

    -


    Bacillus cereus ATCC 11778

    Bacillus cereus ATCC 11778
    Clostridium botulinum

    Clostridium botulinum
    Clostridium perfringens ATCC 13124

    Clostridium perfringens ATCC 13124
    Clostridium tetani ATCC 19406

    Clostridium tetani ATCC 19406