109207 SMAC agar - Питательная среда - SMAC агар с сорбитолом

Питательная среда Мерк, Германия (Merck KGaA)

Агар МакКонки c сорбитом (SMAC-агар) - Sorbitol-MacConkey Agar (SMAC Agar)

Кат.№109207.0500
Упаковка - 500 г

Селективный агар для выделения и дифференциации энтерогеморрагического штамма (EHEC) E.coli O157:H7 из продуктов питания и клинического материала. Среда соответствует рекомендациям DIN Norm 10167 по определению серотипа О157:Н7 Е.coli в продуктах питания и FDA/ВАМ по выделению энтерогеморрагической Е. coli.

Принцип действия

Соли желчных кислот и кристаллический фиолетовый подавляют рост грамположительной флоры. Внесение CT-добавки (цефиксим + теллурит калия) увеличивает селективность среды для Е.coli О157:H7 и угнетает сопутствующую микрофлору. Для обнаружения Е.coli О157:H7 агар МакКонки с сорбитом и селективной СТ-добавкой (CT-SMAC-агар) эффективнее, чем НС-агар (Szabo) по мнению Weagant (1995). Сорбит и индикатор нейтральный красный используются для обнаружения сорбит-положительных колоний по покраснению. Сорбит-негативные колонии остаются бесцветными.

Состав (г/л)

Пептон 20,0; хлористый натрий 5,0; соли желчных кислот №3 1,5; сорбит 10,0; кристаллический фиолетовый 0,001; нейтральный красный 0,03; агар-агар 15,0.

Приготовление

Растворить 51,5 г/л дистиллированной воды, дать среде набухнуть в течение 20-30 мин, автоклавировать 15 мин при 121°С. рН7,1±0,2 при 25°С. Среда прозрачная, красного цвета.

CT-SMAC-агар

Растворить 25,8 г в 500 мл дистиллированной воды, автоклавировать 15 мин при 121°С. Добавить 1 мл стерильной дистиллированной воды во флакон с лиофилизированной CT-добавкой (Кат.№1.09202.0010). Тщательно перемешать и внести в стерильный СМАК-агар, охлажденный до 50°С. Среда прозрачная, красного цвета. рН7,1±0,2 при 25°С.

Проведение анализа

Инокулируют бульон mЕC или mTSB, используя 25 г исследуемого материала и 225 мл бульона и инкубируют 18-24°С при 35-37°С в аэробных условиях. Около 1 мл бульонной культуры наносят штрихом на поверхность SMAC-агара так, чтобы получить изолированные единичные колонии. Инкубация 16-24 ч при 35-37 °С. Фекалии наносят непосредственно петлей и инкубируют 16-24 ч при 37°С. Сорбит-негативные колонии отсевают и исследуют со специальной сывороткой.

Контроль качества

Тест-штаммы	Обнаружение, %	Цвет колоний	Сорбит
E. coli 0157:H7 ATCC 35150	≥ 70	бесцветный	-
E. coli ATCC 11775	≥ 70	красный	+
Serratia marcescens ATCC 14756	≥ 70	красный	+
Bacillus cereus ATCC 11778	≥ 0,01

На SMAC агаре E.coli O157:H7 растут в виде бесцветных колоний, E.coli и Serratia marcescens в виде красных колоний.

Контроль качества CT-SMAC-агар

Тест -штаммы	Инокулюм, КОЕ/мл	Выход, %	Цвет колоний	Сорбит
E. coli 0157:H7 ATCC 35150	10³-10⁵	≥ 60	бесцветный	-
E. coli ATCC 11775	10³-10⁵	≤ 0,01
E. coli ATCC 87639	≥10⁵	≤ 0,01		+
Serratia marcescens ATCC 14756	≥10⁵	≤ 0,01		+
Bacillus cereus ATCC 11778	≥10⁵	≤ 0,01

На CT-SMAC агаре E.coli O157:H7 растут в виде бесцветных колоний, тогда как E.coli и Serratia marcescens не растут не растут на данной среде.