Singlepath-Salmonella

Аналоги других производителей

Экспресс-тест для определения сальмонелл

подробнее

подробнее

Экспресс-тест Мерк, Германия (Merck KGaA)

Экспресс-тесты Singlepath-Salmonella производства фирмы Мерк предназначены для выявления бактерий рода Salmonella. Определение сальмонелл с помощью Singlepath-тестов основано на методе визуальной иммунохроматографии (разновидность иммуноферментного анализа).

Тест представляет собой диагностическую панель с лункой для добавления обогащенного образца, контрольной (С) и тестовой (Т) зоной. Антигены определяемых бактерий, присутствующие в образце, взаимодействуют с меченными золотом антителами, включенными в состав теста, с образованием окрашенного комплекса антиген-антитело. Окрашенный комплекс связывается с иммобилизованными антителами с образованием линий в тестовом и контрольном окнах.

Схема выявления сальмонелл:

- Неселективное обогащение на забуференной пептон­ной воде (25г образца +225мл BPW). При 37^оС, 18-24ч.
- Селективное обогащение на среде RVS - Rappaport-Vassiliadis (магниевая среда). 0,1мл культуральной жидкости к 9,9 мл среды. Инкубация при 41^оС, 18-24ч.
- Инактивация. Прогреть 2мл культуральной жидкости на водяной бане при 100^оС, 15 мин
- Singlepath-тест. Добавить 160мкл инактивированной культуральной жидкости. Учесть результаты через 20мин - визуальное определение наличия линий в тестовой и контрольной зоне теста.
- Подтверждение. Высев положительных результатов на дифференциально-диагностичес­кие среды РАМБАХ-агар, XLT4-агар или висмут-сульфитный агар.

Инструкция

Экспресс-тест для определения сальмонелл - Singlepath^® Salmonella

Кат.№104140.0001
Упаковка - 25 тестов/уп.

Экспресс-тест Singlepath^® Salmonella – иммунохроматографический тест на основе меченных золотом антител применяется для предварительного качественного выявления сальмонелл в пищевых продуктах (например, говядина, мясо индейки, специи, молочные продукты, орехи, морепродукты и др.) и кормах.

Введение

Сальмонеллы вызывают большинство пищевых отравлений во всем мире. Сальмонеллы были выделены из различного типа сырых продуктов (мясные продукты, яйца, растительные продукты). Их высокая устойчивость к высушиванию в сочетании с высокой устойчивостью к нагреванию делает сальмонеллы чрезвычайно опасной угрозой загрязнения пищевых продуктов (особенно сухих).

Выявление сальмонелл из пищевых продуктов классическим методом включает 3 этапа: неселективное обогащение (18-24 часа), селективное обогащение (по крайней мере) на двух различных селективных питательных средах (24-48 часов) и последующий посев на дифференциально-диагностические агаризованные среды (24-48 часов). Общее время, необходимое для получения результата о наличии/отсутствии сальмонелл в образце составляет до 5 дней.

Метод выявления сальмонелл с использованием экспресс-теста Singlepath^®-Salmonella позволяет дать ответ уже через 20 мин после этапа селективного обогащения.

Принцип действия

Singlepath^® Salmonella – является иммунохроматографическим экспресс-тестом на основе меченных золотом антител. Тест Singlepath^®-Salmonella представляет собой диагностическую тест-панель с круглой лункой для добавления образца, овальным окном с тестовой (Т) и контрольной (С) зонами.

1. Образец добавляется в круглую лунку теста.
2. Образец адсорбируется подложкой теста и взаимодействует со специфичными к сальмонеллам мечеными антителами.
3. В присутствии антигена сальмонелл образуется меченый комплекс антиген-антитело, который мигрирует до зоны связывания в тестовой зоне (Т).
4. Зона связывания содержит антитела к комплексу антиген-антитело. В результате образуется четкая красная линия.
5. Оставшийся образец продолжает движение к контрольной зоне (С) и образует четкую красную линию, указывающую на то, что тест работает правильно.

Чувствительность метода - 1 клетка (КОЕ) сальмонеллы в 25 г образца.

Ограничения метода

1. Интенсивность окраски зависит от серогруппы и концентрации клеток сальмонелл
2. На результат не влияет наличие сопутствующих микроорганизмов

Условия хранения

Экспресс-тест Singlepath^®-Salmonella стабилен до даты, указанной на упаковке, при хранении в условиях +2-8^оС. 

Проведение анализа

1. Смешать 25 г(мл) образца с 225 мл среды забуференной пептонной воды, при необходимости гомогенизировать образец. Инкубировать в течение 18-24ч при 37^оС.
2. Перенести 0,1 мл образца к 10 мл бульона RVS (Rappaport-Vassiliadis). Инкубировать 18-24ч при 41,5^оС.
3. Перенести 1-2 мл культуральной жидкости в полипропиленовую (или стеклянную) пробирку и инкубировать на кипящей водяной бане 15 минут. Дать остыть до комнатной температуры.

Singlepath-тестирование

1. Перед использованием обогащенный образец и тест Singlepath^®-Salmonella должны быть комнатной температуры (обычно тесты хранятся в холодильнике).
2. Вскрыть пакет из фольги, в который упакован Singlepath^® тест. Положить Singlepath^® тест на ровную поверхность и отмаркировать (указать номер исследуемого образца). Тестирование должно быть проведено в течение2 часов после вскрытия фольги!
3. Используя микропипетку и одноразовый наконечник, добавить 160 мкл термически инактивированной и охлажденной культуральной жидкости в круглую лунку для образца.
4. Считать результаты через 20 минут после добавления образца.

Примечание: рекомендуется считывать результаты не позднее 25 минут после добавления образца к тесту, до того, как тест начнет подсыхать.

Интерпретация результатов

1. Результаты теста учитываются только при наличии четкой красной линии в контрольной зоне (С) через 20 минут.
2. Образец считается положительным, если после 20 минут или ранее красные линии образовались как в тестовой (Т), так и в контрольной (С) зоне.
3. Образец считается отрицательным, если красная линия отсутствует в тестовой зоне (Т), но присутствует в контрольной зоне (С).
4. Тест следует повторить, если красные линии отсутствуют как в тестовой, так и в контрольной зоне через 20 минут.

Примечание:
Результат, полученный иммуноферментным методом, с использованием теста Singlepath^®-Salmonella является предварительным и должен быть подтвержден посевом на дифференциально-диагностические среды в соответствии с ИСО 6579:2002 (или ГОСТ 52814-2007). Выделенную чистую культуру в дальнейшем необходимо подтвердить биохимическими и серологическими методами.